生化檢測(cè)法快速檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留

       目前，農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法很多，按分類可分為生化檢測(cè)法和色譜快速檢測(cè)法。生化檢測(cè)法中又以酶抑制法應(yīng)用。該法由于操作簡(jiǎn)單，成本較低，較短時(shí)間內(nèi)能檢測(cè)大量樣本（每次檢測(cè)時(shí)間約20分鐘），特別適合在果蔬生產(chǎn)基地和蔬菜批發(fā)市場(chǎng)使用。我站新引進(jìn)"NC一800"農(nóng)藥殘留快速測(cè)定儀，就是利用生物體內(nèi)提取液進(jìn)行生化反應(yīng)來(lái)判斷是否存在農(nóng)藥殘留及污染的情況。此項(xiàng)工作開(kāi)展1年來(lái)，檢測(cè)準(zhǔn)確率高、效果好，群眾很受歡迎。

一、工作原理

在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥能抑制乙酰膽堿酶的活性，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)，加入反應(yīng)試劑——酶后，應(yīng)用分光光度法測(cè)定吸光值隨時(shí)間的變化值計(jì)算出抑制率，來(lái)判斷農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)。

二、操作步驟

1．樣品提取取2克蔬菜樣品（葉菜類要剪成寬度1厘米左右的菜樣，塊根菜取1厘米左右的表皮樣品）放入三角瓶中，用移液器，加入10毫升緩沖液振蕩2分鐘后倒入放有過(guò)濾紙的三角瓶上，濾出的液體即為待測(cè)試報(bào)。

2．樣品測(cè)試在1厘米的比色皿中，加入酶100微升，然后加入待測(cè)試液2．5毫升，搖勻，靜置10分鐘后，再加入顯色劑100微升，然后加底物20微升，搖勻后馬上放入測(cè)定儀，按“樣品測(cè)量”鍵，1分鐘后，數(shù)據(jù)結(jié)果馬上可打印出來(lái)（可貯存3000條數(shù)據(jù)）。由于測(cè)定儀有6個(gè)樣品通道，可同時(shí)測(cè)6個(gè)樣品。

3．結(jié)果判斷樣品的抑制率在40％～50％之間，為懷疑農(nóng)藥含量超標(biāo)，為求數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，重做1次；或用氣相色譜法進(jìn)一步確認(rèn)，若抑制率大于50％即為農(nóng)藥超標(biāo)。

三、注意事項(xiàng)

1．磷酸鹽緩沖液的配置一定要用蒸餾水或純凈水或礦泉水，否則影響準(zhǔn)確性。

2．酶試劑及底物要在0～5℃溫度條件下保存，以確保酶的活性，因此，應(yīng)在冰箱中保存，但不能凍至結(jié)冰。

3．微量移液器要，貼上標(biāo)簽，避免交叉使用造成試劑污染；試劑從試劑瓶吸出后，不能再放回瓶中，堅(jiān)持只吸不進(jìn)的原則，防止試劑污染。

4．樣品測(cè)試的zui后一道程序，即加底物后，應(yīng)馬上搖勻，放入測(cè)定儀，否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。經(jīng)實(shí)踐，在菠菜樣品的測(cè)試中，立刻放入的抑制率為21．4％，1分鐘后放入的51．7％，可見(jiàn)，加試劑后放入時(shí)間的長(zhǎng)短可影響其準(zhǔn)確性。

5．韭菜、芹菜、蒜、蔥及茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。因此．，處理這類樣品時(shí)，可采取整株蔬菜浸出提取液的方法（不要搞爛樣品）。對(duì)葉綠素含量較高的蔬菜，也可采取類似方法。

6．該法只是定性檢測(cè)法，只能檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)，不適用于其它類型農(nóng)藥的檢測(cè)。

（通聯(lián)：廣東省平遠(yuǎn)縣農(nóng)業(yè)局農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢站 514600）

四川農(nóng)業(yè)科技，2006（2）

來(lái)源：上海農(nóng)業(yè)網(wǎng)